『壹』 色譜柱中，為什麼甲基橙和亞甲基藍兩組分需要採用不同的洗脫劑
在柱色譜中常需要更換溶劑來梯度洗脫產物以達到分離的目的以下是洗脫的一般步驟：先用非極性溶劑洗，一般使用石油醚，實驗室合成的產物都是極性比較大的，所以洗不出來，在產物中的大分子類似於色素的東西也不會出來。然後逐漸增大極性，如CH2Cl2+石油醚，洗一會，然後換成純二氯甲烷，三氯甲烷等等一般實驗室過柱子使用的最大極性的流動相是甲醇，一般這個還洗不出來那就不是產物而是大分子色素了，沒有實際意義。當然如果是做高聚物的就不是這個順序了。
『貳』 硅膠柱層析為何要控制石油醚的流速
硅膠柱層析分離的原理是根據物質在硅膠上的吸附力不同而得到分離， 一般情況下極性較大的物質易被硅膠吸附，極性較弱的物質不易被硅膠吸附，整個層析過程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸過程。
石油醚流速過快將影響分離效果。
『叄』 柱層析實驗中，為什麼先用乙醇溶液作為洗脫劑，再用去水做洗脫劑進行洗脫，兩者能否換一下次序為什麼
一般洗脫劑的選擇是這樣的：樣品吸附在氧化鋁柱上後,用合適的溶劑進行洗脫,這種溶劑稱為洗脫劑.如果原來用於溶解樣品的溶劑沖洗柱不能達到分離的目的,可以改用其他溶劑,一般極性較強的溶劑影響樣品和氧化鋁之間的吸附,容易將樣品洗脫下來,達不到分離的目的.因此常用一系列極性漸次增強的溶劑,既先使用極性最弱的溶劑,然後加入不同比例的極性溶劑配成洗脫溶劑.常用的洗脫溶劑的極性按如下次序遞增.己烷和石油醚＜環己烷＜四氯化碳＜三氯乙烯＜二硫化碳＜甲苯＜二氯甲烷＜氯仿＜乙醚＜乙酸乙酯＜丙酮＜丙醇＜乙醇＜甲醇＜水＜吡啶＜乙酸
『肆』 柱層析法的原理是什麼
柱層析原理:
柱層析法的分離原理是根據物質在硅膠上的吸附力不同而使各組分分離。一般情況下極性較大的物質易被硅膠吸附，極性較弱的物質不易被硅膠吸附。當採用溶劑洗脫時，發生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的過程，吸附力較強的組分，移動的距離小，後出柱；吸附力較弱的組分，移動的距離大，先出柱。
硅膠柱層析流動相：
極性小的用乙酸乙酯：石油醚系統；極性較大的用甲醇：氯仿系統；極性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系統；拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸
一般都是利用極性相似相容原理，看流動相與固定相的極性，大部分是固定相的極性小於流動相，然後流動相的極性與所要洗脫的物質極性比較接近，從而將物質洗脫下來。
『伍』 關於過柱子梯度洗脫的問題
過柱子要具體問題具體分析。你提供的信息太少了。TLC上有幾個點，你確定的Rf是多少，柱子的大小，分離物質的量。
目前的極性過大了。減小極性，比如EA：PE=1:1-1:2（找用TLC趴一下，我只是估計值）,將第2點壓制到Rf=0.1-0.2之間，用該極性洗脫劑過柱。可以保證1，2，3點完全分開。
或者將第2點趴到Rf=0.3，然後將極性減小一倍。該極性和前面方法得到的差不多大。
柱子大小和樣品量還可以。先將樣品上柱，干法最好，若用濕法上樣則先用石油醚沖下50mL，再改用洗脫劑淋洗。淋洗液的極性從第2點Rf=0.1時候的極開始性，當出現第一點時，逐漸放大淋洗液的極性，到出現第2點時，繼續放大到Rf=0.2時候的極性。
其間具體放大多少，視第1點和第3點的Rf而定，與距離第2點的遠近有關。
『陸』 硅膠層析的硅膠柱層析技術
硅膠柱層析原理
硅膠層析法的分離原理是根據物質在硅膠上的吸附力不同而得到分離， 一般情況下極性較大的物質易被硅膠吸附，極性較弱的物質不易被硅膠吸附，整個層析過程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸過程。
硅膠柱層析流動相
極性小的用乙酸乙酯：石油醚洗脫；極性較大的用甲醇：氯仿洗脫；極性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸洗脫；拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸
硅膠柱層析慣用方法 稱量。200-300目硅膠，稱30-70倍於上樣量；如果極難分，也可以用100倍量的硅膠H。干硅膠的視密度在0.4左右，所以要稱40g硅膠，用燒杯量100ml也可以。 攪成勻漿。加入干硅膠體積一倍的溶劑用玻璃棒充分攪拌。如果洗脫劑是石油醚/乙酸乙酯/丙酮體系，就用石油醚拌；如果洗脫劑是氯仿/醇體系，就用氯仿拌。如果不能攪成勻漿，說明溶劑中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不與水配伍走分配色譜的話，必須預先用無水硫酸鈉久置乾燥。氯仿用無水氯化鈣乾燥，以除去1%的醇。如果樣品對酸敏感，不能用氯仿體系過柱。 裝柱。將柱底用棉花塞緊，不必用海沙，加入約1/3體積石油醚（氯仿），裝上蓄液球，打開柱下活塞，將勻漿一次傾入蓄液球內。隨著沉降，會有一些硅膠沾在蓄液球內，用石油醚（氯仿）將其沖入柱中。 壓實。沉降完成後，加入更多的石油醚，用雙聯球或氣泵加壓，直至流速恆定。柱床約被壓縮至9/10體積。無論走常壓柱或加壓柱，都應進行這一步，可使分離度提高很多，且可以避免過柱時由於柱床萎縮產生開裂。 上樣。干法濕法都可以。海沙是沒必要的。上樣後，加入一些洗脫劑，再將一團脫脂棉塞至接近硅膠表面。然後就可以放心地加入大量洗脫劑，而不會沖壞硅膠表面。 過柱和收集。柱層析實際上是在擴散和分離之間的權衡。太低的洗脫強度並不好，推薦用梯度洗脫。收集的例子：10mg上樣量，1g硅膠H，0.5ml收一餾分；1-2g上樣量，50g硅膠（200-300目），20-50ml收一餾分。 檢測。要更多地使用專用噴顯劑，如果僅用紫外燈，會損失較多產品，紫外的靈敏度一般比噴顯劑底1-2個數量級。 送譜。收集的產品旋干，在送譜前通常需要重結晶。如果樣品太少或為液體，可過一小凝膠柱，作為送譜前的最後純化手段。可除去氫譜1.5ppm左右所謂的「硅膠」峰。
『柒』 吸附柱色譜分離中怎麼選擇洗脫劑
在進行吸附柱色譜分離時，應根據樣品的性質、吸附劑的性能、流動相的極性三方面的影響因素加於選擇。一般的選擇規律是：樣品極性較大，在極性吸附劑柱上進行分離，則應選用吸附性較弱（即活性較低）的吸附劑，用極性較大的溶劑進行洗脫。組分的極性較弱，就應選用吸附性較強（即活性較高）的吸附劑，用極性較小的溶劑進行洗脫。
化合物極性與其結構有關。按結構的特徵，各種有機物的極性大小順序為：
烷烴 <烯烴 <醚類 <硝基化合物 <酯類 <酮類 <醛類 <胺類 <醇類 <酚類 <酸類
常用溶劑的極性大小順序為：
石油醚 < 環己烷 < 四氯化碳 < 苯 < 乙醚 < 乙酸乙酯 < 丙酮 < 乙醇 < 水
『捌』 硅膠柱層析原理
[編輯本段]硅膠柱層析原理
硅膠層析法的分離原理是根據物質在硅膠上的吸附力不同而得到分離，
一般情況下極性較大的物質易被硅膠吸附，極性較弱的物質不易被硅膠吸附，整個層析過程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸過程。
[編輯本段]硅膠柱層析流動相
極性小的用乙酸乙酯：石油醚系統；極性較大的用甲醇：氯仿系統；極性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系統；拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸
[編輯本段]硅膠柱層析慣用方法
1.稱量。200-300目硅膠，稱30-70倍於上樣量；如果極難分，也可以用100倍量的硅膠H。干硅膠的視密度在0.4左右，所以要稱40g硅膠，用燒杯量100ml也可以。
2.攪成勻漿。加入干硅膠體積一倍的溶劑用玻璃棒充分攪拌。如果洗脫劑是石油醚/乙酸乙酯/丙酮體系，就用石油醚拌；如果洗脫劑是氯仿/醇體系，就用氯仿拌。如果不能攪成勻漿，說明溶劑中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不與水配伍走分配色譜的話，必須預先用無水硫酸鈉久置乾燥。氯仿用無水氯化鈣乾燥，以除去1%的醇。如果樣品對酸敏感，不能用氯仿體系過柱。
3.裝柱。將柱底用棉花塞緊，不必用海沙，加入約1/3體積石油醚（氯仿），裝上蓄液球，打開柱下活塞，將勻漿一次傾入蓄液球內。隨著沉降，會有一些硅膠沾在蓄液球內，用石油醚（氯仿）將其沖入柱中。
4.壓實。沉降完成後，加入更多的石油醚，用雙聯球或氣泵加壓，直至流速恆定。柱床約被壓縮至9/10體積。無論走常壓柱或加壓柱，都應進行這一步，可使分離度提高很多，且可以避免過柱時由於柱床萎縮產生開裂。
5.上樣。干法濕法都可以。海沙是沒必要的。上樣後，加入一些洗脫劑，再將一團脫脂棉塞至接近硅膠表面。然後就可以放心地加入大量洗脫劑，而不會沖壞硅膠表面。
6.過柱和收集。柱層析實際上是在擴散和分離之間的權衡。太低的洗脫強度並不好，推薦用梯度洗脫。收集的例子：10mg上樣量，1g硅膠H，0.5ml收一餾分；1-2g上樣量，50g硅膠（200-300目），20-50ml收一餾分。
7.檢測。要更多地使用專用噴顯劑，如果僅用紫外燈，會損失較多產品，紫外的靈敏度一般比噴顯劑底1-2個數量級。
8.送譜。收集的產品旋干，在送譜前通常需要重結晶。如果樣品太少或為液體，可過一小凝膠柱，作為送譜前的最後純化手段。可除去氫譜1.5ppm左右所謂的「硅膠」峰。
注意事項
1.先根據TLC方法篩選好洗脫劑，使兩相鄰物質Rf值之差最大化
2.將柱子必須裝平整、均勻
3.考慮有限柱填料的吸附量
4.可考慮用剃度法分開並洗脫
『玖』 硅膠柱層析的洗脫劑可以選用石油醚，甲醇嗎
常用的洗脫劑包括：石油醚、正己烷、乙酸乙酯、二氯甲烷、甲醇等良溶劑；根據需要，四氫呋喃、二甲亞碸之類的溶劑也都可以嘗試；
石油醚的極性較低、甲醇的極性較高；
通常來說，最好先在薄層層析板上先試試，然後再上柱子