1. 提取與分離葉綠體色素的原理分別是什麼
提取葉綠體色素的原理是葉綠素是葉綠酸的酯，在鹼的作用下，可使其酯鍵發生皂化作用，生成葉綠酸的鹽，能溶於水。
分離葉綠體色素的原理是類胡蘿卜素中，胡蘿卜素是不飽和的碳氫化合物，β—胡蘿卜素水解可生成2分子維生素A，葉黃素是由胡蘿卜素衍生的二元醇，不能與鹼發生皂化反應，根據這一點，可以將葉綠素和類胡蘿卜素分開。
(1)皂化反應加入石油醚有什麼作用擴展閱讀：
紙層析法一般用於葉綠體中色素的分離，葉綠體中色素主要包括胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b，將葉片碾碎，浸出綠色液體，將液體與層析液（石油醚）混合，將濾紙一段進入混合液體。
四種色素它們在層析液中的溶解度不同，溶解度大的隨層析液在濾紙上擴散地快，反之則慢。最後在濾紙上留下4條色素帶，由此觀查出各種色素的相對含量和種類。所以利用紙層析法能將葉綠體中的色素分離。
參考資料來源：網路——葉綠體色素
2. 葉綠體色素提取,分離及理化性質的鑒定實驗報告
實驗三 葉綠體色素的提取分離與理化性質鑒定
一、實驗目的
1、學會葉綠體色素提取和分離的方法。
2、了解葉綠體色素的熒光現象、皂化反應等理化性質。
二、實驗原理
葉綠體中含有綠色素（包括葉綠素a和葉綠素b）和黃色素（包括胡蘿卜素和葉黃素）兩大類，這兩類色素都不溶於水，而溶於有機溶劑，故可用乙醇或丙酮等有機溶劑提取。
提取液可用色層分析的原理加以分離。因吸附劑對不同物質的吸附力不同，當用適當的溶劑推動時，混合物中各成分在兩相（流動相和固定相）間具有不同的分配系數，所以它們的移動速度不同，經過一定時間層析後，便將混合色素分離。
葉綠素是一種二羧酸——葉綠酸與甲醇和葉綠醇形成的復雜酯，故可與鹼起皂化反應而生成醇（甲醇和葉綠醇）和葉綠酸的鹽，產生的鹽能溶於水中，可用此法將葉綠素與類胡蘿卜素分開；葉綠素與類胡蘿卜素都具有光學活性，葉綠素吸收光量子而轉變成激發態，激發態的葉綠素分子很不穩定，當它變回到基態時可發射出紅光量子，因而產生熒光。葉綠素中的鎂可以被H+所取代而成褐色的去鎂葉綠素，後者遇銅則成為綠色的銅代葉綠素，銅代葉綠素很穩定，在光下不易破壞，故常用此法製作綠色多汁植物的浸漬標本。
三、實驗器材
新鮮的植物葉片。
研缽；漏斗；100ml三角瓶；玻璃棒；剪刀；滴管；培養皿；定性濾紙條（5cm×1.5cm）。
毛細管；試管；試管架；石棉網；燒杯（100ml）；酒精燈；鐵三角架；刻度吸量管2ml、5ml各1支。
四、實驗試劑
1、95%乙醇；石英砂；碳酸鈣粉
2、推動劑：按石油醚：丙酮：苯（10：2：1）比例配製（體積比）
3、醋酸銅粉末；5%的稀鹽酸
4、甲醇、KOH
五、實驗步驟
1．葉綠體色素的提取
（1）取菠菜或其他植物新鮮葉片4~5片（2g左右），洗凈，擦乾，去掉中脈，剪碎，放入研缽中。
（2）研缽中加入少量石英砂及碳酸鈣粉，加2~3ml 95%乙醇，研磨至糊狀，再加10ml 95%乙醇，暗處放置3~5min，上清液過濾於三角瓶中，殘渣用10ml 95%乙醇沖洗，一同過濾於三角瓶中。
2. 葉綠體色素的分離
（1）取一塊預先乾燥處理過的定性濾紙，將它剪成長約10cm ，寬約1cm的濾紙條。
（2）用毛細管吸取色素提取液。在濾紙條的一端（約距這一端的1cm處）劃出一條濾液細線，等濾液乾燥後，再重復劃4～5次。
（3）將濾紙條的另一端（約距這一端1cm處）折成「V」字形，並將它掛在放有層析液的燒杯壁上（注意：色素線要略高於層析液面，且濾紙條下端最好不要碰到燒杯壁），蓋上培養皿。
3.葉綠體色素的性質鑒定
(1)熒光現象的觀察
取1支20ml刻度試管加入5ml葉綠體色素乙醇提取液，在直射光下觀察溶液的透射光與反射光顏色有何不同？解釋原因。
(2)皂化作用（綠色素與黃色素的分離）
在做過熒光現象觀察的葉綠體色素乙醇提取液試管中加入1.5ml 20%KOH-甲醇溶液，充分搖勻。片刻後，加入5ml苯，搖勻，再沿試管壁慢慢加入1～1.5ml蒸餾水，輕輕混勻（勿激烈搖盪），於試管架上靜置分層。若溶液不分層，則用滴管吸取蒸餾水，沿管壁滴加，邊滴加邊搖動，直到溶液開始分層時，靜置。可以看到溶液逐漸分為兩層，下層是稀的乙醇溶液，其中溶有皂化的葉綠素a和b（以及少量的葉黃素）；上層是苯溶液，其中溶有黃色的胡蘿卜素和葉黃素。
(3)H+和Cu++對葉綠素分子中Mg++的取代作用
取上述色素乙醇提取液少許於試管中，加入5%HCl數滴，搖勻，直至溶液出現褐綠色，當溶液變褐後，再加入少量醋酸銅粉末，微微加熱，觀察記載溶液顏色變化情況。
六、注意事項
1、為了避免葉綠素的光分解，操作應在弱光下進行。
2、研磨時間盡可能短些，以不超過兩分鍾為宜。
3、在低溫下發生皂化反應的葉綠體色素溶液，易乳化而出現白絮狀物，溶液渾濁，且不分層。可激烈搖勻，放在30～40℃的水浴中加熱，溶液很快分層，絮狀物消失，溶液變得清澈透明。
七、實驗報告
1、將紙層析法分離葉綠體色素的實驗結果貼在實驗報告紙上，並給予分析。
《你看著少抄點》