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基因表达载体的工具有哪些

发布时间: 2023-04-19 06:15:04

Ⅰ 构建基因表达载体的工具都有什么

1、复制子,在细菌中扩增时所必须。 2、启动子,目的基因在细菌或细胞中转录所必须,转录了才能翻译,是谓“表达”。 3、原核筛选标记,细菌增菌所必须。 4、真核筛选标记,如果是真核表达,就是必须的。 5、多克隆位点,即酶切位点,插入目的片段的区域。

Ⅱ 请根据所学知识,将下面培育转基因动物的相关内容补充完整.(1)在构建基因表达载体时要用到的工具酶有_

(1)在构建基因表达载体时要用到的工具酶有限制酶和DNA连辩族乱接酶.一个基因表达载体的组成,主要有目的基因、标记基因、启动子和终止子,其中启动子位于基因首端,是RNA聚合酶识别和结合的位点.标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来.
(2)体外受精获得受携档精卵首先要将采集的精子经获能处理后,才能与处于减数第二次分裂中期的卵子结合形成受精卵.判断卵子受精的重要标志是在卵细胞膜和透明带间隙观察到两个极体.
故答案为:
(1)限制酶 DNA连接酶 启动子 终止子 启动子RNA聚合酶 为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来
(2)获能 减数第二次分裂中期 在卵细胞膜和透明穗梁带间隙观察到两个极体

Ⅲ 基因工程需要的工具及操作步骤

一、基因工程需要三个工具:

1、剪刀:限制酶。

2、针线:DNA连接酶。

3、运输:运载体。

二、基因工程四个步骤:

1、目的基因的获取。

2、基因表达载体的构建(目的基因与运载体结合)。

3、将目的基因导入受体细胞。

4、目的基因的检测与表达。

Ⅳ 1.2.基因工程常用的工具酶和载体有哪些

  1. 酶:

    DNA连接酶,

    DNA聚合酶(PCR中使用,eg. Taq, Q5, S15......)

    限制性内切酶(BamH1, Sau3AI, 大概上百种,根据识别酶切位点的序列而定),

    CIP(碱性磷酸酶,去磷酸化,防止质粒自连)

  2. 载体:

    对于细菌来说(质粒): 复制载体: pUC18, pUC19.....对应使用的宿主如 Top10

    表达载体:pACYC, pET 系列的质粒,对应表达宿主如BL21

    对于动物和植物来说也可以用质粒来做载体,但转化方法不太一样,比如植物需要农杆菌转化法细菌用热激或电转。

Ⅳ 基因工程常用的载体

问题一:基因工程中使用的载体有哪些 基因工程载体:
在基因工程重组DNA技术中将DNA片段(目的基因)转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。三种常用的载体是质粒、λ噬菌山桥亮体的衍生物和动植物病毒,最常用的是质粒。
用途:
在基因操作过程中使用运载体有两个用途:一是用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去;二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制。
基因工程中载体需要满足的条件:
1有一个或多个限制酶的切点,便于目的基因插入
2有自我复制能力或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA复制的能力
3必须带有标记基因,以便筛选
4对受体细胞无害
5大小合适,便于操作
天然质粒并不完全具备上述条件,所以都要进行人工改造。
希望对你有帮助~

问题二:基因工程常用的载体有哪些?作为基因工程的载体,应具备什么特点 1)具有一个或多个限制酶切点,以供外源基因插入其中; 2)具有标记基因,以鉴定重组是否进入受体细胞; 3)能自我复制,否则可能导致重组丢失; 4)对受体细胞无害; 5)大小应适合,以便消谨提取和在体外进行操作,太大不便操作.

问题三:基因工程需要哪些常见载体,都具有什么抗性? 有真核的,如:pEGFP-N1(卡那抗性)、pCMV-myc(氨苄抗性)、pCDNA系列、pBUDCE4(博来霉素抗性)
原核表达载体如:pGEX系列(pGEX-5X-3、pGEX-4T-1等,一般是氨苄抗性)、pET系列(有氨苄的有卡那的)
还有原核、真核都表达的穿梭载体,看你要什么样的了

问题四:基因工程使用的载体有哪些? 细菌的质粒,λ噬菌体的衍生物,某些灭活的病毒,新型的还有某些叶绿体或线粒体DNA等

问题五:基因工程中使用的载体有哪些 基因工程载体:
在基因工程重组DNA技术中将DNA片段(目的基因)转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。三种常用的载体是质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒,最常用的是质粒。
用途:
在基因操作过程中使用运载体有两个用途:一是用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去;二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制。
基因工程中载体需要满足的条件:
1有一个或多个限制酶的切点,便于目的基因插入
2有自我复制能力或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA复制的能力
3必须带有标记基因,以便筛选
4对受体细胞无害
5大小合适,便于操作
天然质粒并不完全具备上述条件,所以都要进行人工改造。
希望对你有帮助~

问题六:基因工程常用的载体有哪些?作为基因工程的载体,应具备什么特点 1)具有一个或多个限制酶切点,以供外源基因插入其中; 2)具有标记基因,以鉴定重组是否进入受体细胞逗宽; 3)能自我复制,否则可能导致重组丢失; 4)对受体细胞无害; 5)大小应适合,以便提取和在体外进行操作,太大不便操作.

问题七:常用的基因载体有哪些?载体必须满足哪些条件 基因工程载体:
在基因工程重组DNA技术中将DNA片段(目的基因)转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。三种常用的载体是质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒,最常用的是质粒。
用途:
在基因操作过程中使用运载体有两个用途:一是用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去;二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制。
基因工程中载体需要满足的条件:
1有一个或多个限制酶的切点,便于目的基因插入
2有自我复制能力或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA复制的能力
3必须带有标记基因,以便筛选
4对受体细胞无害
5大小合适,便于操作
天然质粒并不完全具备上述条件,所以都要进行人工改造。

问题八:基因工程需要哪些常见载体,都具有什么抗性? 有真核的,如:pEGFP-N1(卡那抗性)、pCMV-myc(氨苄抗性)、pCDNA系列、pBUDCE4(博来霉素抗性)
原核表达载体如:pGEX系列(pGEX-5X-3、pGEX-4T-1等,一般是氨苄抗性)、pET系列(有氨苄的有卡那的)
还有原核、真核都表达的穿梭载体,看你要什么样的了

Ⅵ 基因表达载体的构建需要哪些工具酶

需要DNA聚合酶,内切酶和连接酶。

Ⅶ 构建基因表达载体必须的工具酶是

构建基因表达载体必须的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶。基因是产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。基因支持着生命的基本构造和性能。储存着生命的种族、血型、孕育、生长、凋亡等过程的全部信息。
环境和遗传的互相依赖,演绎着生命的繁衍、细胞分裂和蛋白质合成等重要生理过程。生物体的生、长、衰、病、老、死等一切生命现象都与基因有关。它也是决定生命健康的内在因素。因此,基因具有双重属性:物质性(存在方式)和信息性(根本属性)。

Ⅷ 基因载体与基因表达载体的区别

在基因工程中,携带目的基因进入宿主细胞进行扩增和表达的工具称为载体,载体实际上是具有运载能力的DNA.依据功能,载体可以分为克隆载体和表粗码达载体.克隆载体用于在宿主细胞中克隆和扩增外援片段;表段皮达载体握凳差则用于在宿主细胞中获得外援基因的表达产物.

Ⅸ 基因表达载体的构建需要哪些工具酶

限制性核酸内切酶或限制酶——比作剪刀 DNA连接酶——比作针线(包括T4DNA连接酶 热稳定DNA连接酶等) 楼上的说的不对
这还有几种酶的比较 有兴趣就看看 希望采纳

限制性核酸内切酶(以下简称限制酶):限制酶主要存在于微生物(细菌、霉菌等)中.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子.是特异性地切断DNA链中磷酸二酯键的核酸酶(“分子手术刀”).发现于原核生物体内,现已分离出100多种,几乎所有的原核生物都含有这种酶.是重组DNA技术和基因诊断中重要的一类工具酶.例如,从大肠杆菌中发现的一种限制酶只能识别GAATTC序列,并在G和A之间将这段序列切开.目前已经发现了200多种限制酶,它们的切点各不相同.苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因,就能被某种限制酶切割下来.在基因工程中起作用. DNA连接酶:主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键,起连接作用,在基因工程中起作用. DNA聚合酶:主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键,在DNA复制中起做用. DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羟基上,形成磷酸二酯键;而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键. DNA聚合酶是以一条DNA链为模板,将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链;而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来.因此DNA连接酶不需要模板. DNA连接
RNA聚合酶(又称RNA复制酶、RNA合成酶)的催化活性:RNA聚合酶以完整的双链DNA为模板,转录时DNA的双链结构部分解开,转录后DNA仍然保持双链的结构.真核生物RNA聚合酶:真核生物的转录机制要复杂得多,有三种细胞核内的RNA聚合酶:RNA聚合酶I转录rRNA,RNA聚合酶II转录mRNA,RNA聚合酶III转录tRNA和其它小分子RNA.在RNA复制和转录中起作用. 反转录酶:RNA指导的DNA聚合酶,具有三种酶活性,即RNA指导的DNA聚合酶,RNA酶,DNA指导的DNA聚合酶.在分子生物学技术中,作为重要的工具酶被广泛用于建立基因文库、获得目的基因等工作.在基因工程中起作用. 解旋酶:是一类解开氢键的酶,由水解ATP来供给能量它们常常依赖于单链的存在,并能识别复制叉的单链结构.在细菌中类似的解旋酶很多,都具有ATP酶的活性.大部分的移动方向是5'→3',但也有3'→5'移到的情况,如n'蛋白在φχ174以正链为模板合成复制形的过程中,就是按3'→5'移动.在DNA复制中起做用. DNA限制酶作用于磷酸二酯键 DNA连接酶作用于磷酸二酯键 DNA聚合酶作用于磷酸二酯键 DNA解旋酶作用于氢键

Ⅹ 基因工程的基本工具

基因工程的基本工具:

1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)

来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。

功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。

结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。

2、“分子缝合针”——DNA连接酶

两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶扮睁碧厅举和T4-DNA连接酶)的比较:相同点:都缝合磷酸二酯键。

区别:E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。

与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。

3、“分子运输车”——载体

载体具备的条件:能在受体细胞中复制并稳定保存。具有一至多早滚个限制酶切点,供外源DNA片段插入。具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。

最常用的载体是:质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。

其它载体:λ 噬菌体的衍生物、动植物病毒。

(10)基因表达载体的工具有哪些扩展阅读:

基因工程的应用:

1、植物基因工程:抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利用转基因改良植物的品质。

2、动物基因工程:提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。

3、基因治疗:把正常的外源基因导入病人体内,使该基因表达产物发挥作用。