Ⅰ 葉綠素中黃色素和綠色素分離的原理
方法 :
1、紙層析法分離葉綠體色素(方法1)(1) 稱取新鮮葉片(木茨、菜心、菠菜等葉均可)1克,剪碎,放在研缽中,加乙醇5m1,共研磨成勻漿,靜置5分鍾。(2) 用滴管吸取上面的色素提取液4~5滴。一滴一滴地滴在濾紙的中央(濾紙要平放在表面皿或培養皿上)。待色素點風干後,向該色素點上慢慢滴加汽油,使四種色素(葉綠素a、葉綠素b、葉黃素、胡蘿卜素)在濾紙上分離出來,四種色素在濾紙上的移動速度是胡蘿卜素(橙黃色)>葉黃素(黃色)>葉綠素a(藍綠色)>葉綠素b(黃綠色)。
2、紙層析法分離葉綠體色素(方法2) (1) 稱2克新鮮綠色遲野液葉片,剪碎,放在研缽中,加入5ml乙醇,共研磨成勻漿,過濾,該濾液即為色素提取液。(2)取一塊預先乾燥處理過的定性濾紙,將它剪成長約10cm ,寬約1cm的濾紙條。(3)用毛細管吸取色素提取液。在濾紙條的一端(約距這一端的1cm處)劃出一條濾液細線,等濾液乾燥後,再重復劃4~5次。(4)將濾紙條的另一端(約距這一端1cm處)拆成「V」字形,並將它掛在放有層析液的燒杯壁上(注意:色素線要略高於層析液面,且濾紙條下端最好不要碰到燒杯壁),蓋上培養皿。(5)經幾分鍾後,觀察色素帶的分布,最上端為胡蘿卜素,其次是葉黃素,再次是葉綠素a,最後是葉綠素b。
3、葉綠體色素的性質鑒定(1)葉綠體色素的提取取菠菜(或其他植物)葉子2g,加石英砂和碳酸鈣少許,乙醇約5ml,研磨成勻漿,再加乙醇15ml,用漏斗過濾,即為色素提取液。(2)葉綠素的熒光碼物現象取上述色素乙醇提取液少許於試管中,在反射光和透射光下觀察色素提取液的顏色有什麼不同。反射光下觀察到的溶液顏色,即為葉綠素產生的熒光現象。(3)光對葉綠素的破壞作用取上述色素乙醇提取液少許,分裝在2支試管中,1支試管放在暗處(或用黑紙包裹),另1支試管放在強光下(太陽光),經2—3小時後,觀察兩支試管中溶液的顏色有何不同?(4)銅在葉綠素分子中的替代作用取上述色素乙醇提取液少許於試管中,1滴1滴地加入鹽酸,直至溶液出現褐綠色,此時葉綠素分子已遭破壞,形成去鎂葉綠素。然後加醋酸銅晶體1小粒,慢慢地在酒精燈上加熱溶液,使溶液又產生亮綠色,此即表明銅已在葉綠素分子中替代了原來鎂的位置。(5)黃色素和綠色素的分離將葉綠體色素的酒精提取液10毫升倒入分液漏斗脊派中,傾斜漏斗,並沿其壁慢慢加入15毫升汽油(或乙醚),輕輕搖動5分鍾,靜置片刻後,溶液即分為兩層,上層為綠色的汽油層,主要含有葉綠素。為使色素分離完全,從分液漏斗放出下層酒精溶液,將之盛於乾燥的試管(A)中,再往留在分液漏斗中的汽油層色素溶液加入95%酒精5ml,輕輕搖動之,棄去下層黃色溶液,並將上層綠色的葉綠素汽油層提取液放入試管(B)中,用棉花塞住試管口。同樣將試管(A)所盛的黃色酒精溶液倒入分液漏斗中,加入汽油5ml,輕輕搖動分液漏斗,將下層黃色溶液放入試管(C)中,塞以棉花。最後用分光鏡觀察綠色溶液和黃色溶液的吸收光譜。(6)黃色和綠色溶液的吸收光譜的觀察用手持分光鏡觀察黃色溶液和綠色溶液的吸收光譜。
Ⅱ 怎樣從樹葉或綠色蔬菜中提取銅葉綠酸鈉的實驗方案
食品中加入適量的色素,有助於改善食品的外觀,提高人們的食慾。綠色素有全人工合成、半人工合成(將天然色素進行部分化學處理後的產品)和天然提取物3種類型。隨著人們生活水平的提高,天然色素和半人工合成色素越來越受到人們的青睞。由菠菜等綠色植物提取的葉綠素是一種天然色素,它可直接用於食品,但其對光和熱很不穩定,在使用時受到了一定程度的限制。作者介紹的葉綠銅酸鈉,是天然葉綠素經化學處理後的一種安全食用色素,其性質穩定,色澤鮮亮。植物葉子中葉綠素的含量很低,大約僅占鮮葉質量的0.3%,而風乾的蠶沙(糞)中葉綠素的含量比樹葉高出6~7倍。因此,蠶沙是製取葉綠銅酸鈉的優良原料。葉綠銅酸鈉不僅物喚可用於食品工業,而且還可用於制葯業、日用化工業等各領域。由於葉綠銅酸鈉對肝渣螞亂炎、胃潰瘍、貧血等有療效作用,故已被製成葯品出售。<br>1.原料及試劑<br>1)蠶沙取樣於貴州省遵義縣;<br>2)試劑乙醇如檔、石油醚為化學純,丙酮、NaOH和CuSO4為分析純。<br>2.實驗<br>2.1萃取<br>將蠶沙粉碎,稱取100g蠶沙粉放入500mL容積的反應瓶中,噴灑占蠶沙質量30%的清水,並攪拌均勻,放置4~5h後,加入200mL95%的乙醇,用濃NaOH溶液調節pH值至8,加熱迴流2h後,冷卻至室溫。抽濾得濾液,濾渣再加入200mL95%的乙醇迴流1.5h,冷卻至室溫後抽濾得濾液。<br>2.2皂化<br>將兩次濾液合並,減壓蒸餾,除去一半溶劑。在攪拌的前提下向反應瓶中緩緩加入由2gNaOH與10mL水配成的溶液。然後加熱迴流1.5h,冷卻至室溫,用150mL石油醚分3次(每次50mL)對反應混合物萃取洗滌,以除去非極性化合物。<br>2.3置換<br>然後再向醇相中加入1gCuSO4,用稀H2SO4調節pH值至2~3,於70℃左右攪拌反應1h.減壓除去溶劑得膏狀物,用8~10倍膏狀物質量的蒸餾水將膏狀物化開,攪拌10min,抽濾。除去水溶性雜質(如MgSO4、H2SO4、Na2SO4以及末參與反應的CuSO4等),將所得固形物用丙酮溶解(如有少量不溶物,則過濾除去),於攪拌下緩緩滴加5%的NaOH溶液,使體系的pH值等於11.室溫放置2h,析出固形物、抽濾、紅外乾燥,得墨綠色粉末狀葉綠銅酸鈉1~1.3g。<br>
Ⅲ 為什麼管花肉蓯蓉可以用石油醚提取
1.本發明涉及活性成分提取技術領域,具體涉及一種管花肉蓯蓉中活性成分的提取方法。
背景技術:
2.管花肉蓯蓉是一種列當科寄生植物,通常稱為紅柳大芸,寄生於檉柳屬植物的根上,主要分布於我國新疆北部的和田和新疆南部的塔克拉瑪干沙漠周圍地區。同時,管花肉蓯蓉又是一種珍貴的滋補中草葯,被譽為「沙漠人參」,它具有滋補腎臟,抗衰老,增強血液精華,滋潤大腸,使大便通暢的功能。研究表明苯乙醇苷,環烯醚萜和多糖是管花肉蓯蓉的主要化學成分。苯乙醇苷是管花肉蓯蓉的主要活性成分,具有神經保護,免疫調節,抗炎,保肝和抗氧化的作用。苯乙醇苷是一組水溶性天然產物,是由肉桂酸和羥基苯乙基組成的共同結構,它們分別通過酯和糖苷鍵與β
‑
吡喃葡萄糖連接,其主要成分是松果菊苷和毛蕊花糖苷。
3.現有的肉蓯蓉提取方法主要包括:溶劑萃取法、微波輔助提取法、超聲提取法、高剪切輔助提取法等方法。其中,溶劑萃取法具有溶劑用量大,耗時長等缺點。微波萃取法具有設備簡單,操作時間短,溶劑沒扮用量少,但其提取率較低,不易自動化,缺乏與其他儀器在線聯機的可能性。超聲提取法操作簡便,設備簡單,提取率高,但其工作時間長,消耗溶劑量大,不易自動化。
技術實現要素:
4.針對現有技術中的上述不足,本發明提供了一種管花肉蓯蓉的提取方法,該提取方法可有效解決現有的提取方法存在的溶劑用量大、提取率低、苯乙醇苷純度低的問題。
5.為實現上述目的,本發明解決其技術問題所採用的技術方案是:
6.一種管花肉蓯蓉的提取方法,包括以下步驟:
7.(1)取鮮肉蓯蓉,依次進行滅酶、切塊、乾燥和粗碎處理得粉末;
8.(2)將肉蓯蓉粉末依次在石油醚/乙醚/30
‑
60%乙醇混合溶液、60
‑
95%乙醇溶液和水中進行超聲提取,每次提取後過濾,靜置冷卻,分離去除石油醚、乙醚和沉澱物,收集30
‑
60%乙醇提取液、60
‑
95%乙醇提取液和水提液並合並,然後濃縮去除乙醇,得肉蓯蓉提取液;
9.(3)將肉蓯蓉提取液濃縮乾燥,粉碎,製得。
10.上述方案中,先對新鮮的肉蓯蓉進行滅酶處理,減少後續處理過程中的酶促反應,提高肉蓯蓉中有效成分的含量;然後對其進行切塊並乾燥,將乾燥粗碎後過40目篩,將獲得螞亮的肉蓯蓉粉末先在石油醚/乙醚/30
‑
60%乙醇混合溶液中提取,提取同時進行攪拌處理,由於石油醚和乙醚的極性較小,且兩者極性不同,具有一定的跨度,石油醚和乙醚均為有機溶劑,在攪拌提取過程中,肉蓯蓉中易溶於不同極性有機溶劑的雜質成分分別被石油醚和乙醚吸收,可減少溶解於悶察寬乙醇溶液中雜質成分的含量,提高乙醇溶液中對有效成分的溶解度,
進而在促進提取效率的基礎上可降低溶劑的使用量;
11.先使用低濃度的乙醇溶液再使用高濃度的乙醇溶液進行提取,由於不同濃度的乙醇溶液的極性不同,且在細胞內的穿透力不同,採用不同體積濃度的乙醇進行提取,可充分將肉蓯蓉中的有效成分提出,最後,用水進行提取,由於水的極性最大,苯乙醇苷易溶於極性大的溶劑中,因此,可進一步將有效成分提出。
12.本發明中,通過在提取過程中利用有效成分和雜質成分在不同溶劑中的溶解度不同,使用不同溶劑進行提取,在提取過程中將雜質成分分離,提高苯乙醇苷有效成分的分離。
13.進一步地,步驟(1)中滅酶操作為:將鮮肉蓯蓉於70
‑
80℃條件下蒸煮20
‑
40min。
14.進一步地,步驟(1)中的乾燥溫度為50
‑
80℃。
15.進一步地,步驟(1)中的乾燥溫度為80℃。
16.上述方案中,乾燥溫度過高,會導致有效成分降解破壞,降低提取率,乾燥溫度過低,導致乾燥時間延長,不利於節能。
17.進一步地,步驟(2)中肉蓯蓉粉末在每種溶劑中的超聲處理次數均為2
‑
3次,每次超聲時間為5
‑
10min,每次超聲間隔15
‑
30min。
18.進一步地,步驟(2)中肉蓯蓉粉末在每種溶劑中的超聲處理次數均為2次,每次超聲時間為10min,每次超聲間隔20min。
19.進一步地,步驟(2)中超聲功率為150
‑
250w。
20.進一步地,步驟(2)中超聲功率為200w。
21.上述方案中,利用超聲波的空化作用將細胞破壞,加速有效成分溶出,且超聲處理過程中,可增加溶出的成分在不同溶劑中的溶解度,提高雜質與有效成分的分離效果。
22.進一步地,步驟(2)中提取溫度為60
‑
80℃。
23.進一步地,步驟(2)中提取溫度為80℃。
24.上述方案中,提取溫度不宜過高,否則易造成有效成分破壞,降低提取率,一定的溫度下提取,可增加不同成分在不同溶劑中的溶解度,進一步提高有效成分和雜質的分離效果,提高有效成分的提取率。
25.進一步地,步驟(2)中肉蓯蓉粉末與石油醚/乙醚/30
‑
60%乙醇混合溶液、60
‑
95%乙醇溶液和水的質量比分別為1:15
‑
25、1:10
‑
20和1:10
‑
20。
26.進一步地,步驟(2)中肉蓯蓉粉末與石油醚/乙醚/30
‑
60%乙醇混合溶液、60
‑
95%乙醇溶液和水的質量比分別為1:15、1:10和1:10。
27.上述方案中,肉蓯蓉粉末分別與不同的溶劑按照一定比例混合,促進有效成分溶出,提高提取率。
28.進一步地,步驟(2)石油醚/乙醚/30
‑
60%乙醇混合溶液中石油醚、乙醚和30
‑
60%乙醇的體積比為1
‑
2:1
‑
2:3
‑
5。
29.進一步地,步驟(2)石油醚/乙醚/30
‑
60%乙醇混合溶液中石油醚、乙醚和30
‑
60%乙醇的體積比為1:1:4。
30.上述方案中,肉蓯蓉還含有大量的環烯醚萜類物質和其他雜質,用石油醚和乙醚作為溶劑,可將該類雜質溶解吸附,減少雜質在乙醇溶液中的溶解量,進而提高提取純度。
31.進一步地,步驟(2)中石油醚/乙醚/30
‑
60%乙醇混合溶液、60
‑
95%乙醇溶液和水
的ph值均為4
‑
6。
32.進一步地,步驟(2)中石油醚/乙醚/30
‑
60%乙醇混合溶液、60
‑
95%乙醇溶液和水的ph值均為5。
33.上述方案中,在弱酸性條件下進行提取,弱酸性條件下可破壞肉蓯蓉中環烯醚萜等雜質成分結構,進一步提高有效成分的含量。
34.進一步地,步驟(2)中將肉蓯蓉粉末依次在石油醚/乙醚/50%乙醇混合溶液、75%乙醇溶液和水中進行超聲提取,每次提取後過濾,靜置冷卻,分離去除石油醚、乙醚和沉澱物,收集50%乙醇提取液、75%乙醇提取液和水提液並合並,然後濃縮去除乙醇,得肉蓯蓉提取液。
35.上述方案中,分別採用50%和75%體積濃度的乙醇進行提取,利用不同濃度乙醇極性不同的特性,充分將肉蓯蓉的有效成分提取,提高有效成分的提取率。
36.本發明所產生的有益效果為:
37.1、本發明中首先在弱酸性條件下對肉蓯蓉進行提取,弱酸性條件下,部分雜質成分結構變化後產生沉澱析出,可初步降低提取溶劑中雜質含量,再分別採用石油醚/乙醚/30
‑
60%乙醇混合溶液、60
‑
95%乙醇溶液和水中進行提取,可進一步利用石油醚和乙醚對肉蓯蓉中雜質成分進行溶解吸收,降低乙醇提取液和水提液中雜質含量,提高乙醇提取液和水提液中有效成分的溶解度,進而降低乙醇提取液和水提液的使用量。
38.2、本發明中在提取過程中利用不同的方式對雜質成分進行分解或吸附,可充分減少提取物中雜質的含量,提高苯乙醇苷活性成分的純度和提取率。
具體實施方式
39.實施例1
40.一種管花肉蓯蓉的提取方法,包括以下步驟:
41.(1)取鮮肉蓯蓉,於70℃條件下蒸煮20min進行滅酶、切成1
×
1cm的小塊、於60℃條件下乾燥和粗碎過40目篩得粉末;
42.(2)將肉蓯蓉粉末依次在溫度均為60℃,ph值均為4的石油醚/乙醚/30%乙醇混合溶液、60%乙醇溶液和水中進行超聲提取,超聲功率為150w,在每種溶劑中的超聲處理次數為2次,每次超聲時間為5min,每次超聲間隔15min,在每種溶劑中提取後過濾,靜置冷卻,分離去除石油醚、乙醚和沉澱物,收集30%乙醇提取液、60%乙醇提取液和水提液並合並,然後濃縮去除乙醇,得肉蓯蓉提取液;其中,提取過程中,肉蓯蓉粉末與石油醚/乙醚/30%乙醇混合溶液、60%乙醇溶液和水的質量比分別為1:15、1:10和1:10;石油醚/乙醚/30%乙醇混合溶液中石油醚、乙醚和30%乙醇的體積比為1:1:3;
43.(3)將肉蓯蓉提取液於60℃條件下濃縮乾燥至含水率小於15%,粉碎,製得。
44.實施例2
45.一種管花肉蓯蓉的提取方法,包括以下步驟:
46.(1)取鮮肉蓯蓉,於75℃條件下蒸煮40min進行滅酶、切成2
×
2cm的小塊、於70℃條件下乾燥和粗碎過40目篩得粉末;
47.(2)將肉蓯蓉粉末依次在溫度均為80℃,ph值均為6的石油醚/乙醚/60%乙醇混合溶液、95%乙醇溶液和水中進行超聲提取,超聲功率為250w,在每種溶劑中的超聲處理次數
為3次,每次超聲時間為10min,每次超聲間隔30min,在每種溶劑中提取後過濾,靜置冷卻,分離去除石油醚、乙醚和沉澱物,收集60%乙醇提取液、95%乙醇提取液和水提液並合並,然後濃縮去除乙醇,得肉蓯蓉提取液;其中,提取過程中,肉蓯蓉粉末與石油醚/乙醚/60%乙醇混合溶液、95%乙醇溶液和水的質量比分別為1:25、1:20和1:20;石油醚/乙醚/60%乙醇混合溶液中石油醚、乙醚和60%乙醇的體積比為2:1:4;
48.(3)將肉蓯蓉提取液於80℃條件下濃縮乾燥至含水率小於15%,粉碎,製得。
49.實施例3
50.一種管花肉蓯蓉的提取方法,包括以下步驟:
51.(1)取鮮肉蓯蓉,於75℃條件下蒸煮30min進行滅酶、切成2
×
2cm的小塊、於80℃條件下乾燥並粗碎過40目篩得粉末;
52.(2)將肉蓯蓉粉末依次在溫度均為80℃,ph值均為5的石油醚/乙醚/50%乙醇混合溶液、75%乙醇溶液和水中進行超聲提取,超聲功率為200w,在每種溶劑中的超聲處理次數為2次,每次超聲時間為10min,每次超聲間隔20min,在每種溶劑中提取後過濾,靜置冷卻,分離去除石油醚、乙醚和沉澱物,收集50%乙醇提取液、75%乙醇提取液和水提液並合並,然後濃縮去除乙醇,得肉蓯蓉提取液;其中,提取過程中,肉蓯蓉粉末與石油醚/乙醚/50%乙醇混合溶液、75%乙醇溶液和水的質量比分別為1:15、1:10和1:10;石油醚/乙醚/50%乙醇混合溶液中石油醚、乙醚和50%乙醇的體積比為1:1:4;
53.(3)將肉蓯蓉提取液於80℃條件下濃縮乾燥至含水率小於15%,粉碎,製得。
54.對比例1
55.一種管花肉蓯蓉的提取方法,包括以下步驟:
56.(1)取鮮肉蓯蓉,於75℃條件下蒸煮30min進行滅酶、切成2
×
2cm的小塊、於80℃條件下乾燥並粗碎過40目篩得粉末;
57.(2)將肉蓯蓉粉末在溫度為80℃的75%的乙醇溶液中進行超聲提取,超聲功率為200w,超聲處理次數為2次,每次超聲時間為10min,每次超聲間隔20min,提取後過濾,靜置冷卻,分離去除沉澱物,收集75%乙醇提取液,濃縮去除乙醇,得肉蓯蓉提取液;
58.(3)將肉蓯蓉提取液於80℃條件下濃縮乾燥至含水率小於15%,粉碎,製得。
59.對比例2
60.一種管花肉蓯蓉的提取方法,包括以下步驟:
61.(1)取鮮肉蓯蓉,於75℃條件下蒸煮30min進行滅酶、切成2
×
2cm的小塊、於80℃條件下乾燥並粗碎過40目篩得粉末;
62.(2)將肉蓯蓉粉末依次在溫度均為80℃的50%乙醇溶液、75%乙醇溶液和水中進行超聲提取,超聲功率為200w,在每種溶劑中的超聲處理次數為2次,每次超聲時間為10min,每次超聲間隔20min,在每種溶劑中提取後過濾,靜置冷卻,分離去除沉澱物,收集50%乙醇提取液、75%乙醇提取液和水提液並合並,然後濃縮去除乙醇,得肉蓯蓉提取液;
63.(3)將肉蓯蓉提取液於80℃條件下濃縮乾燥至含水率小於15%,粉碎,製得。
64.對比例3
65.一種管花肉蓯蓉的提取方法,包括以下步驟:
66.(1)取鮮肉蓯蓉,於75℃條件下蒸煮30min進行滅酶、切成2
×
2cm的小塊、於80℃條件下乾燥並粗碎過40目篩得粉末;
67.(2)將肉蓯蓉粉末在溫度均為80℃,ph值為5的水中進行超聲提取,超聲功率為200w,超聲處理次數為2次,每次超聲時間為10min,每次超聲間隔20min,提取後過濾,靜置冷卻,得肉蓯蓉提取液;
68.(3)將肉蓯蓉提取液於80℃條件下濃縮乾燥至含水率小於15%,粉碎,製得。
69.對比例4
70.一種管花肉蓯蓉的提取方法,包括以下步驟:
71.(1)取鮮肉蓯蓉,於75℃條件下蒸煮30min進行滅酶、切成2
×
2cm的小塊、於80℃條件下乾燥並粗碎過40目篩得粉末;
72.(2)將肉蓯蓉粉末依次在溫度均為80℃,ph值均為5的石油醚/乙醚/40%乙醇混合溶液、90%乙醇溶液和水中進行迴流提取,在每種溶劑中提取後過濾,靜置冷卻,分離去除石油醚、乙醚和沉澱物,收集40%乙醇提取液、90%乙醇提取液和水提液並合並,然後濃縮去除乙醇,得肉蓯蓉提取液;其中,提取過程中,肉蓯蓉粉末與石油醚/乙醚/50%乙醇混合溶液、75%乙醇溶液和水的質量比分別為1:15、1:10和1:10;石油醚/乙醚/50%乙醇混合溶液中石油醚、乙醚和50%乙醇的體積比為1:1:4;
73.(3)將肉蓯蓉提取液於80℃條件下濃縮乾燥至含水率小於15%,粉碎,製得。
74.對比例5
75.一種管花肉蓯蓉的提取方法,包括以下步驟:
76.(1)取鮮肉蓯蓉,於75℃條件下蒸煮30min進行滅酶、切成2
×
2cm的小塊、於80℃條件下乾燥並粗碎過40目篩得粉末;
77.(2)將肉蓯蓉粉末依次在溫度均為80℃,ph值均為5的石油醚/乙醚/50%乙醇混合溶液、75%乙醇溶液和水中進行超聲提取,超聲功率為200w,在每種溶劑中的超聲處理次數為2次,每次超聲時間為10min,每次超聲間隔20min,在每種溶劑中提取後過濾,靜置冷卻,分離去除石油醚、乙醚和沉澱物,收集50%乙醇提取液、75%乙醇提取液和水提液並合並,然後濃縮去除乙醇,得肉蓯蓉提取液;其中,提取過程中,肉蓯蓉粉末與石油醚/乙醚/50%乙醇混合溶液、75%乙醇溶液和水的質量比分別為1:10、1:5和1:5;石油醚/乙醚/50%乙醇混合溶液中石油醚、乙醚和50%乙醇的體積比為3:3:5;
78.(3)將肉蓯蓉提取液於80℃條件下濃縮乾燥至含水率小於15%,粉碎,製得。
79.試驗例
80.分別對實施例1
‑
3和對比例1
‑
5中的收集的粉末進行稱重,計算出提取物的收率,並分別測定提取物中中松果菊苷、毛蕊花糖苷和苯乙醇總苷的含量,具體結果見表1
‑
2。
81.收率計算公式:收率=肉蓯蓉提取物質量/肉蓯蓉質量
×
100%
82.表1:收率統計
[0083][0084]
分別對獲得的提取物中進行檢測,具體檢測方法如下:
[0085]
1、hplc測定松果菊苷和毛蕊花糖苷
[0086]
1.1儀器與用具:高效液相色譜儀、容量瓶100ml、分析天平、移液管和超聲儀。
[0087]
1.2試劑與試液:50%甲醇、純甲醇、純甲醇為流動相a,0.1%甲酸溶液為流動相b,
松果菊苷標准品,毛蕊花糖苷標准品。
[0088]
1.3色譜條件與系統適用性試驗:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以純甲醇為流動相a,以0.1%甲酸溶液為流動相b(34.5:65.5),檢測波長為330nm。理論板數按松果菊苷峰計算應不低於3000。
[0089]
1.4標准品溶液的制備
[0090]
取松果菊苷標准品、毛蕊花糖苷標准品適量,精密稱定分別置棕色瓶中,加50%甲醇製成每1m1各含0.2mg和0.2mg的溶液,即得。
[0091]
1.5供試品溶液的制備
[0092]
取肉蓯蓉提取物(過四號篩)約0.05g,精密稱定,置100ml棕色容量瓶中,精密加入50%甲醇適量,超聲處理10分鍾(功率250w,頻率35khz),使溶解再加50%甲醇稀釋至刻度,搖勻,既得。
[0093]
1.6測定法
[0094]
分別精密吸取標准品溶液與供試品溶液各10μ1,注入液相色譜儀,測定,即得。
[0095]
1.7記錄標准品濃度、標准溶液主峰面積s對、供試液的主峰的面積s供、樣品稱樣量、含量的計算和結果。
[0096]
2、uv測定苯乙醇總苷
[0097]
2.1標准品溶液的制備
[0098]
精密稱取松果菊苷標准品10mg,置50ml棕色容量瓶中,加50%甲醇溶解並稀釋至刻度,即得。
[0099]
2.2標准曲線制備
[0100]
精密量取標准品溶液0.2ml、0.4ml、0.6l、o.8ml、1.0ml,分別置10ml容量瓶中,用50%甲醇稀釋至刻度,搖勻即得。以相應試劑為空白,照紫外
‑
可見分光光度法(《中國葯典》2015年版附錄va),在30mm波長處測定吸光度,以吸光度為縱坐標,濃度為橫坐標,繪制標准曲線。
[0101]
2.3供試品溶液的制備及測定
[0102]
精密稱取供試品粉末30mg於50ml容量瓶中,加50%得甲醇適量超聲溶解,放置至室溫,加50%甲醇至刻度,搖勻。精密量取該溶液1.0m1置25ml容量瓶中,用50%甲醇稀釋至刻度,照標准曲線制備項下的方法,自「以相應試劑為空白」起,依法測定吸光度,從標准曲線中讀取供試品溶液中苯乙醇總苷的量,計算,即得。
[0103]
表2:肉蓯蓉提取物成分分析
[0104] 松果菊苷毛蕊花糖苷苯乙醇總苷灰分實施例1≥35%≥14%≥80%≤5%實施例2≥35%≥14%≥80%≤5%實施例3≥35%≥14%≥80%≤5%對比例1≤35%≤14%≤80%≤5%對比例2≤35%≤14%≤80%≤5%對比例3≤35%≤14%≤80%≤5%對比例4≤35%≤14%≤80%≤5%對比例5≤35%≤14%≤80%≤5%
[0105]
結合表1和表2可以看出,實施例1
‑
3中的提取物的收率在3.5
‑
3.8%之間,提取物中松果菊苷含量均≥35%,毛蕊花糖苷含量均大於≥14%,苯乙醇總苷含量均≥80%,且灰分均≤5%。而對比例1
‑
3中提取物收率雖然高於實施例1
‑
3,但是其中的有效成分松果菊苷、毛蕊花糖苷和苯乙醇總苷的含量均小於實施例,綜合比較後可知,實施例中的提取工藝由於對比例中的提取工藝。
[0106]
將對比例1與實施例3進行對比,未限定的弱酸性條件下提取,取消石油醚和乙醚的加入,並僅在75%乙醇中提取,由於石油醚和乙醚取消,導致肉蓯蓉中雜質成分溶解於乙醇溶劑中,使得收率得以提高;未限定弱酸性條件,也使得雜質成分增多,進一步導致收率增加;但是由於提取物中雜質成分未分離去除,導致提取物中有效成分含量降低,使得產品質量不符合標准要求。
[0107]
將對比例2與實施例3進行對比,未限定在弱酸性條件下提取,取消石油醚和乙醚,導致肉蓯蓉中雜質成分溶解於乙醇溶劑中,使得提取率得以提高,未限定弱酸性條件,也使得雜質成分增多,進一步導致收率增加;但是由於提取物中雜質成分未分離去除,導致提取物中有效成分含量降低,使得產品質量不符合標准要求;將對比例1和對比例2進行對比可知,對比例2中採用的不同濃度的乙醇和水進行分別提取,可充分將肉蓯蓉中的成分提出,導致提取物的收率有所提高。
[0108]
將對比例3與實施例3進行對比,僅在水中進行提取,肉蓯蓉中的水溶性成分溶解於水中,其收率一般,但是由於水中的雜質較多,導致提取物中有效成分的含量下降。
[0109]
將對比例4與實施例3進行對比,在不同濃度的乙醇溶液中進行迴流提取,由於取消了超聲提取,空化作用消失,導致成分溶出減少,收率降低;乙醇濃度過高,影響在肉蓯蓉中的滲透作用,也進一步減少了有效成分隨溶劑的溶出量,導致提取物中有效成分佔比下降。
[0110]
將對比例5與實施例3進行對比,改變了肉蓯蓉粉末與不同提取溶劑的比例關系,導致肉蓯蓉中有效成分溶出受限,降低了收率。
Ⅳ 高中生物實驗 綠葉色素的提取
葉綠素提取的准備工作是在一個半暗的房間里,室溫保持在25℃。
提取步驟如下:
(1) 取1000克新鮮的綠葉,在韋氏攪切器中粉碎。
(2)將粉碎的1000克綠葉放進加有少量的碳酸鈣的丙酮中旦陵(溫度20℃)進行萃取,直到過濾、清洗後的葉子碎片為無色。
(3)將過濾後的丙酮提取液放到盛有1升石油醚和100ml丙酮的漏斗中,然後輕輕地旋轉,同時加放蒸餾水直到分層為止。水層的大部分丙酮和水溶雜質被丟棄,只剩石油醚溶液。
(4)將石油醚溶液用蒸餾水再次凈化後,用含有石油醚和0.01克草酸的200ml80%的甲醇溶液清洗5次以上,最後得到黃綠色懸浮液。
(5)用無水硫酸鈉對懸浮液進行乾燥,並將其滲入到3cm厚的蔗糖粉末製成柱中,然後用石油醚清洗沉澱的色素去掉類胡蘿卜素,使之只含有天然的葉綠素。
(6)含有天然葉綠素的蔗糖柱分兩層,綠層有4-10mm的葉綠素b層,另一藍層為2-6mm的葉綠素a層。
(7)將位於藍層正中的部分(約占藍層的一半) 放入醚中,對此懸浮液進行過濾、洗提,用蒸餾水清洗,用硫酸鈉乾燥,再用器皿進行過濾後,得到葉綠素a。
(8)將(6)中的綠層中模碼戚間部分移出,迅速放入醚中過濾、洗提,製成葉綠素b醚溶液。
(4)葉子粉末怎麼用石油醚脫色擴展閱讀:
葉綠素的分離
色譜法是一種很好的分離純化、鑒定有機化合物的重要方法,尤其是在微量分析中應用的更是廣泛。果蔬中色素主要包括脂溶性的胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素和水溶性的花青素。
在提取實驗時,我們可以利用相似相溶的原理把水溶性的花青素濾掉,繼而可以利用薄模悄層色譜、柱色譜、高效液相色譜對胡蘿卜素、葉黃素和葉綠素進行分離。
由於這三種色素的極性依次減弱,可以適當地選擇單一的有機溶劑或者不同配比的混合溶劑作為展開劑和洗脫劑,確定最佳的優化分離條件。
葉綠素-網路
Ⅳ 提取一葉萩鹼時,最後步驟要用石油醚來洗脫
都是非極性溶劑,乙談棚褲醚一般不做溶劑的,揮發性太強,你不想操作過程中暈倒吧 !石油醚也是非極性的含簡,還便宜,相似相容原理,選擇溶劑和猜無非就是考慮可溶性,成本,毒性
Ⅵ 枇杷葉中提取黃酮類化合物,提取液中的葉綠素怎麼除去。
黃酮類最好用石油醚或陪桐者正已烷脫除葉綠素,比例在原料的1/4就可以了,注意要少量多次脫脂。當然用活性炭也可以(用量可能要在原料量的10%才能脫除——也要少量多次),但要看你敏亂橡的產品的性質——因為活性炭對橋旁黃酮類的吸附還是比較大的。
Ⅶ 如何用化學方法得到葉綠素
實驗目的:從綠葉中提取葉綠素
實驗器材唯扮:剪刀、研缽、碳酸鈣粉末、石英砂(二氧化硅)、葯匙、丙酮試劑、燒杯、玻璃棒、漏斗、分液漏斗、濾紙、綠葉、試管、離心機等。
實驗過程:
1、找來新鮮的綠葉,顏色深綠、葉片肥厚的較好,如菠菜。
2、用水清洗干凈。
3、用剪刀將綠葉剪碎,放入研缽中,加少量石英砂和碳酸鈣粉末(加快研磨速度並防止破壞葉綠素),快速研磨均勻(約3-5分鍾)。
4、將研磨好的綠嫌桐葉轉移至燒杯中,加少量丙酮溶解(丙酮易揮發,且有毒,應小心操作),並用玻璃棒均勻攪拌。
5、過濾。
6、將濾液轉移至數支試管中,放入離心機中進行離心3-5分鍾(轉速3000r/min).
7、用分液漏斗將離心後的溶液進行分離,丙酮比水重,所以要取濾液的下部分,放入小燒杯中。(如有少量水分殘存,可以加入碳酸鎂粉末,然後再過濾即可)
8、用熱水加熱小燒杯,水溫控制在60-80攝氏度芹山坦。(可以用酒精燈加熱,用溫度計測量控制)
9、待丙酮揮發完全後,即可得到葉綠素。
Ⅷ 請問「植物葉中提取有效成分時,如何進行脫脂」
用浸提的方法吧,應該將組織破碎後再進行脫脂,這樣脫脂會比較徹底,加入有機溶劑浸提一定時間後(浸提時間需要自己設定),把植物組織和提取液分開就可以後,讓植物組織在通風的地方放置一段時間,讓組織內殘留的有機溶劑充分揮發後即可進行下一步了.
Ⅸ 油樟葉精油可以用石油醚萃取嗎
可以。棗碰搭植物芳香烴會與石油醚發生加成反應,吵睜因此石油醚可以增大植物精油凳拿的萃取純度,以至於製造商都願意用石油醚萃取油樟葉精油。
Ⅹ 樹葉子如何變透明
樹葉是植物進行光合作用的部分,樹葉的形狀也是不一樣的,有的呈心形,有的呈橢圓形,還有的呈扇形,顏數唯色也是不一樣的,我們看到的最多的顏色是綠色,還有的是紫色、紅色等,但是你見過透明的葉子嘛,那麼今天的問題來了,樹葉子如何變透明?我認為可以參考葉脈書簽的做法。