A. 請問大家石油醚裝柱上樣可以用乙酸乙酯溶解上樣嗎
三樓說的很對，四樓說的稍微有點偏妥。樓主你說石油醚溶解性不好（一般是不會用石油醚拌樣的，我們建議用溶解性好沸點低的溶劑（如DCM）拌樣，甲醇拌樣時候最好不要超過10%，否則容易溶解硅膠），你說乙酸乙酯對你溶解性好，那你可以用乙酸乙酯拌樣，後面你可以採用濕法或者干法裝柱都可以的，沒有關系。
B. 過柱的溶劑的選擇
大多選用石油醚，乙酸乙酯。乙醚也可以用，二氯甲烷也有用的，但是它和硅膠的吸附是一個放熱過程，所以夏天的時候經常會在柱子里產生氣泡，天氣冷的時候會好一些。甲醇據說能溶解部分的硅膠，所以產品如果想過元素分析的話要留神，應該經過後繼處理，比如說重結晶等。在比較嚴格的柱分時就要對溶劑重蒸。當然過原料時就可以免去這一步了，另外溶劑在過柱子後最好也回收使用，這里要注意的是，一般在過柱同時進行的是減壓旋蒸，石油醚和乙酸乙酯的比例由於揮發度的不同會導致極性的變化，一般會使得極性變大，在梯度淋洗時比較合適，正好極性越來越大了。在過完柱子後，溶劑最後回收要採用常壓，因為在減壓旋蒸時會有部分低沸點的雜質一起出來，常壓時就會減少這種現象，如果雜質和你下面要過的樣品有反應那就慘了。
C. 粗脂肪提取為什麼用沸程30-60的石油醚
一般使用提取的石油醚沸程是60-90度的居多，30-60度的石油醚的沸點較低，對實驗的操作會帶來不便。高沸程的石油醚與正己烷的差不多。
D. 用石油醚做重結晶實驗，如何選擇石油醚的沸程是30-60，60-90，還是90-120
30－60，60－90的都行吧，我用的是60－90的，結晶後使用油泵抽干溶劑，或者用旋蒸蒸干。
E. 粗脂肪提取為什麼用沸程30℃~60攝氏度的石油醚呢
粗脂肪提取用沸程30℃~60攝氏度的石油醚，這是因為：
脂肪在石油醚中具有良好的溶解度。選用沸程30℃~60℃的石油醚，沸點比較低，在比較低的溫度下萃取，可以減少澱粉，纖維素以及蛋白質在石油醚中的溶解度，使提取的脂肪純度最高。
F. 沸點是60-90度的石油醚和沸點是90-120度的石油醚 到底有什麼區別在提取效果方面有何不同
主要是分子大小不同，也就是碳鏈的長度不同，碳鏈長，分子量大，沸點就高
提取效果的話就看是什麼體系，一般是從水中把有機物提取出來，這樣的話通常用碳鏈長的也就是沸點高的效果好一些，因為提取的原理是相似相溶，碳鏈越長，跟有機物結構越接近，效果就越好。
不過提取之後一般要分離，就是包有機物和石油醚分開，這樣的話就要考慮低沸點的石油醚了，因為沸點低的話在較低的溫度下石油醚就會蒸發，比較容易分離
所以要綜合考慮，一般是先看看別人是怎麼做的
G. 什麼是跑柱
你要做的是柱層析，又叫過柱子
其基本原理是利用樣品在柱子里的流動速度不同來進行分離。
關於過柱的實驗方法和技巧
常說的過柱子應該叫柱層析分離，也叫柱色譜。我們常用的是以硅膠或氧化鋁作固定相的吸附柱。由於柱分的經驗成分太多，所以下面我就幾年來過柱的體會寫些心得，希望能有所幫助。
1、柱子可以分為：加壓，常壓，減壓
壓力可以增加淋洗劑的流動速度，減少產品收集的時間，但是會減低柱子的塔板數。所以其他條件相同的時候，常壓柱是效率最高的，但是時間也最長，比如天然化合物的分離，一個柱子幾個月也是有的。減壓柱能夠減少硅膠的使用量，感覺能夠節省一半甚至更多，但是由於大量的空氣通過硅膠會使溶劑揮發（有時在柱子外面有水汽凝結），以及有些比較易分解的東西可能得不到，而且還必須同時使用水泵抽氣（很大的噪音，而且時間長）。以前曾經大量的過減壓柱，對它有比較深厚的感情，但是自從嘗試了加壓後，就幾乎再也沒動過減壓的念頭了。加壓柱是一種比較好的方法，與常壓柱類似，只不過外加壓力使淋洗劑走的快些。壓力的提供可以是壓縮空氣，雙連球或者小氣泵（給魚缸供氣的就行）。特別是在容易分解的樣品的分離中適用。壓力不可過大，不然溶劑走的太快就會減低分離效果。個人覺得加壓柱在普通的有機化合物的分離中是比較適用的。
2、關於柱子的尺寸，應該是粗長的最好
柱子長了，相應的塔板數就高。柱子粗了，上樣後樣品的原點就小（反映在柱子上就是樣品層比較薄），這樣相對的減小了分離的難度。試想如果柱子十厘米，而樣品就有二厘米，那麼分離的難度可想而知，恐怕要用很低極性的溶劑慢慢沖了。而如果樣品層只有0.5厘米，那麼各組分就比較容易得到完全分離了。當然採用粗大的柱子要犧牲比較多的硅膠和溶劑了，不過這些成本相對於產品來說也許就不算什麼了（有些不環保的說，不過溶劑回收重蒸後也就減小了部分浪費）。現在見到的柱子徑高比一般在1：5～10，書中寫硅膠量是樣品量的30～40倍，具體的選擇要具體分析。如果所需組分和雜質分的比較開（是指在所需組分rf在0.2～0.4，雜質相差0.1以上），就可以少用硅膠，用小柱子（例如200毫克的樣品，用2cm×20cm的柱子）；如果相差不到0.1，就要加大柱子，我覺得可以增加柱子的直徑，比如用3cm的，也可以減小淋洗劑的極性等等。
3、關於無水無氧柱，適用於對氧，水敏感，易分解的產品
可以濕柱，也可以干柱。不過在樣品之前至少要用溶劑把柱子飽和一次，因為溶劑和硅膠飽和時放出的熱量有可能是產品分解，畢竟要分離的是敏感的東東，小心不為過。也是因為分離的東西比較敏感，所以接收瓶一定要用可密封的，遵循schlenk操作。至於是加壓、常壓、減壓，隨需而定。因為是schlenk操作，所以點板是個問題，如果樣品是顯色的，恭喜了，不用點板，直接看柱子上的色帶就行了。如果樣品無色，只好准備幾十個schlenk瓶，一瓶一瓶的點，不過幾次之後就知道樣品在哪，也就可以省些了。像我以前過一根無水無氧柱，需要六個schlenk，現在只一個就能把所要的全收集到。無水無氧柱中用的比較多的是用氧化鋁作固定相。因為硅膠中有大量的羥基裸露在外，很容易使樣品分解，特別是金屬有機化合物和含磷化合物。而氧化鋁可以做成鹼性、中性和酸性的，選擇餘地比較大，但是比硅膠要貴些。聽說有個方法，就是用石英做柱子，然後用HF254做固定相，這樣在柱子外面用紫外燈一照就知道產品在哪裡了，沒有驗證過。哪位做過可以提出來大家參詳參詳。
4、關於濕法、干法上樣
濕法省事，一般用淋洗劑溶解樣品，也可以用二氯甲烷、乙酸乙酯等，但溶劑越少越好，不然溶劑就成了淋洗劑了。很多樣品在上柱前是粘乎乎的，一般沒關系。可是有的上樣後在硅膠上又會析出，這一般都是比較大量的樣品才會出現，是因為硅膠對樣品的吸附飽和，而樣品本身又是比較好的固體才會發生，這就應該先重結晶，得到大部分的產品後再柱分，如果不能重結晶那就不管它了，直接過就是了，樣品隨著淋洗劑流動會溶解的。有些樣品溶解性差，能溶解的溶劑又不能上柱（比如DMF,DMSO等，會隨著溶劑一起走，顯色是一個很長的脫尾），這時就必須用干法上柱了。樣品和硅膠的量有一種說法是1：1，我覺得是越少越好，但是要保證在旋干後，不能看到明顯的固體顆粒（那說明有的樣品沒有吸附在硅膠上）。溶劑的選擇。當然是最便宜，最安全，最環保的了。所以大多選用石油醚，乙酸乙酯。文獻中有寫用正己烷的，太貴了，除非特別需要不要用,不然銀子嘩嘩的，流的比淋洗劑還快，不過因為極性很小，有時還是非它不可。乙醚也可以用，但是就是容易睡覺，注意保持清醒別讓溶劑流幹了，那樣柱子也就不爽了。二氯甲烷也有用的，但是要知道，它和硅膠的吸附是一個放熱過程，所以夏天的時候經常會在柱子里產生氣泡，天氣冷的時候會好一些。甲醇，據說能溶解部分的硅膠，所以產品如果想過元素分析的話要留神，應該經過後繼處理，比如說重結晶等。其他的溶劑用的相對較少，要依個人的不同需要選擇了。由於某些原因，用到的淋洗劑多是大包裝的（便宜嘛），我們這里是用10升或25升的塑料桶裝的，就要注意這些工業品的純度是較低的。經常能夠從送來的大桶底部看見有色的雜質，其他的雜質就可想而知了，所以在比較嚴格的柱分時就要對溶劑重蒸。當然過原料時就可以免去這一步了，反正下面還有提純的方法。另外溶劑在過柱子後最好也回收使用，一方面環保，另一方面也能節省部分經費，缺點是要消耗一定的人工。這里要注意的是，一般在過柱同時進行的是減壓旋蒸，石油醚和乙酸乙酯的比例由於揮發度的不同會導致極性的變化，一般會使得極性變大，在梯度淋洗時比較合適，正好極性越來越大了。在過完柱子後，溶劑最後回收要採用常壓，因為在減壓旋蒸時會有部分低沸點的雜質一起出來，常壓時就會減少這種現象，如果雜質和你下面要過的樣品有反應那就慘了。
5、關於操作問題。
5.1 裝柱。
柱子下面的活塞一定不要塗潤滑劑，會被淋洗劑帶到產品中的，可以採用四氟節門的。干法和濕法裝柱覺得沒什麼區別，只要能把柱子裝實就行。裝完的柱子應該要適度的緊密（太密了淋洗劑走的太慢），一定要均勻（不然樣品就會從一側斜著下來）。書中寫的都是不能見到氣泡，我覺得在大多數情況下有些小氣泡沒太大的影響，一加壓氣泡就全下來了。當然如果你裝的柱子總是有氣泡就說明需要多練習了。但是柱子更忌諱的是開裂，甭管豎的還是橫的，都會影響分離效果，甚至作廢！
5.2 加樣。
用少量的溶劑溶樣品加樣，加完後將下面的活塞打開，待溶劑層下降至石英砂面時，再加少量的低極性溶劑，然後再打開活塞，如此兩三次，一般石英砂就基本是白色的了。加入淋洗劑，一開始不要加壓，等溶樣品的溶劑和樣品層有一段距離（2～4cm就夠了），再加壓，這樣避免了溶劑（如二氯甲烷等）夾帶樣品快速下行。
5.3 淋洗劑的選擇。
感覺上要使所需點在rf0.2～0.3左右的比較好。不要認為在板上爬高了分的比較開，過柱子就用那種極性，如果rf在0.6，即使相差0.2也不容易在柱子上分開，因為柱子是一個多次爬板的狀態，可以通過公式的比較：0.6/0.8一次的分離度，肯定不如（0.2/0.3）的三次方或四次方大。
5.4 樣品的收集。
用硅膠作固定相過柱子的原理是一個吸附與解吸的平衡。所以如果樣品與硅膠的吸附比較強的話，就不容易流出。這樣就會發生，後面的點先出，而前面的點後出。這時可以採用氧化鋁作固定相。
另外，收集的試管大小要以樣品量而定，特別是小量樣品，如果用大試管，可能一根就收到了三個樣品，wuwu。如果都用小試管那工作量又太大。
5.5 最後的處理。
柱分後的產品，由於使用了大量的溶劑，其中的雜質也會累積到產品中，所以如果想送分析，最好用少量的溶劑洗滌一下，因為大部分的雜質是溶在溶劑里的，一洗基本就沒了，必要時進行重結晶。
另外，再過柱的時候，有時會出現氣泡，一是和使用的溶劑有關，如果是易揮發的溶劑，如乙醚、二氯甲烷等，在室溫稍高的情況下，很容易出現這種現象，因此，在室溫高的時候，可以選擇沸點較高，揮發相對小的溶劑。還有，使用混合溶劑時，使用的兩種溶劑的沸點應該相差不大，如：乙酸乙酯和石油醚(60~90),而乙醚卻要選擇30－60的石油醚。二是：不論是用帶砂板的還是塞棉花的，在裝柱之前，都要將空氣用加壓的方法將空氣排干，這樣就可避免柱中有空氣！過柱子需要耐心，不要著急
H. 石油醚沸點是多少
石油醚的沸點是有分的，我所知道的有兩種，60~90、90~120，根據不同的需要看情況選擇你所需要的溫度，可以用水浴鍋加熱控制溫度。
I. 急急急 關於石油醚的沸點
物質的理化常數:
國標編號 32002
CAS號 8032-32-4
中文名稱 石油醚
英文名稱 petroleun ether
別 名 石油精
分子式 成分為戊烷、己烷 外觀與性狀 無色透明液體，有煤油氣
分子量 蒸汽壓 53.32kPa/20℃ 閃點：<-20℃
熔 點 <-73℃ 沸點：40～80℃ 溶解性 不溶於水，溶於無水乙醇、苯、氯仿、油類等多數有機溶劑
密 度 相對密度(水=1)0.64～0.66；相對密度(空氣=1)2.50 穩定性 穩定
危險標記 7(易燃液體) 主要用途 主要用作溶劑及作為油脂的抽提用
2.對環境的影響:
一、健康危害
侵入途徑：吸入、食入。
健康危害：其蒸氣或霧對眼睛、粘膜和呼吸道有刺激性。中毒表現可有燒灼感、咳嗽、喘息、喉炎、氣短、頭痛、惡心和嘔吐。本品可引起周圍神經炎。對皮膚有強烈刺激性。
二、毒理學資料及環境行為
急性毒性：LD5040mg/kg(小鼠靜脈)；LC503400ppm，4小時(大鼠吸入)
危險特性：其蒸氣與空氣可形成爆炸性混合物。遇明火、高熱能引起燃燒爆炸。燃燒時產生大量煙霧。與氧化劑能發生強烈反應。高速沖擊、流動、激盪後可因產生靜電火花放電引起燃燒爆炸。其蒸氣比空氣重，能在較低處擴散到相當遠的地方，遇明火會引著回燃。
燃燒(分解)產物：一氧化碳、二氧化碳。
3.現場應急監測方法:
4.實驗室監測方法:
氣相色譜法，參照《分析化學手冊》(第四分冊，色譜分析)，化學工業出版社
5.環境標准:
美國 車間衛生標准 100ppm
6.應急處理處置方法:
一、泄漏應急處理
迅速撤離泄漏污染區人員至安全區，並進行隔離，嚴格限制出入。切斷火源。建議應急處理人員戴自給正壓式呼吸器，穿消防防護服。盡可能切斷泄漏源。防止進入下水道、排洪溝等限制性空間。小量泄漏：用活性炭或其它惰性材料吸收。也可以用不燃性分散劑製成的乳液刷洗，洗液稀釋後放入廢水系統。大量泄漏：構築圍堤或挖坑收容；用泡沫覆蓋，降低蒸氣災害。用防爆泵轉移至槽車或專用收集器內，回收或運至廢物處理場所處置。
二、防護措施
呼吸系統防護：空氣中濃度超標時，佩戴過濾式防毒面具(半面罩)。
眼睛防護：戴化學安全防護眼鏡。
身體防護：穿防靜電工作服。
手防護：戴乳膠手套。
其它：工作現場禁止吸煙、進食和飲水。工作畢，淋浴更衣。注意個人清潔衛生。
三、急救措施
皮膚接觸：立即脫去被污染的衣著，用肥皂水和清水徹底沖洗皮膚。
眼睛接觸：立即提起眼瞼，用大量流動清水或生理鹽水徹底沖洗至少15分鍾。就醫。
吸入：迅速脫離現場至空氣新鮮處。保持呼吸道通暢。如呼吸困難，給輸氧。如呼吸停止，立即進行人工呼吸。就醫。
食入：誤服者用水漱口，給飲牛奶或蛋清。就醫。
滅火方法：噴水冷卻容器，可能的話將容器從火場移至空曠處。處在火場中的容器若已變色或從安全泄壓裝置中產生聲音，必須馬上撤離。滅火劑：泡沫、乾粉、二氧化碳、砂土。用水滅火無效。
J. 實驗過程中安全使用石油醚注意哪些問題
摘要 石油醚有30--60度沸點，也有60--90度沸點的。在使用石油醚時，不能有明火，尤其揮散時不要達到閃點，否則要引起爆炸。